АП 85

Оглавление

Оглавление. 2

Введение. 5

Обзор литературы.. 7

Строение вируса гриппа. 7

Противовирусные препараты.. 8

Камфора. 9

Производное камфоры – камфецин. 10

Строение и функции печени. 10

Метаболизм углеводов. 12

Метаболизм белков. 13

Трансаминазы.. 14

Гамма-глутамилтрансфераза (ГГT) 15

Билирубин. 16

Функция детоксикации (биотрансформации ксенобиотиков) 18

Материалы и методы.. 20

Экспериментальные животные. 20

Экспериментальные воздействия. 20

Экспериментальные методы.. 21

Определение активности АЛТ. 21

Определение активности АСТ. 21

Определение активности ГГТ. 21

Определение концентрации глюкозы.. 21

Светооптическое изучение паренхимы печени. 22

Статистическая обработка данных. 22

Результаты и обсуждение. 23

1. Функциональная характеристика реакции печени в условиях длительного введения лекарственных агентов в течение 7 и 14 суток. 23

1.1. Определение активности аланин аминотрансферазы.. 23

1.2. Определение активности аспартат аминотрансферазы.. 25

1.3. Определение активности гамма-глутамилтрансферазы.. 26

1.4. Определение концентрации глюкозы.. 27

1.5. Определение концентрации общего билирубина. 29

1.6. Определение концентрации конъюгированного билирубина. 30

2. Структурная характеристика реакции печени в условиях длительного введения лекарственных агентов в течение 7 и 14 суток. 31

3. Морфо-функциональная характеристика реакции печени в условиях дозозависимого введения нового противовирусного агента камфецина (25 мг/кг и 50 мг/кг) 32

Выводы.. 34

Приложения. 35

Список литературы.. 36

Список сокращений

АЛТ – аланинаминотрансфераза

АСТ – аспартатаминотрансфераза

ГГТ – гамма-глутамилтрансфераза

мРНК – матричная РНК

РНК – рибонуклеиновая кислота

CYP450s - цитохром P450s

HA – гемагглютинины

IAV - вирус гриппа А

NA – нейраминидаза

NP – нуклеокапсидный белок

PLP - пиридоксал фосфат

SA – сиаловая кислота

Введение

Грипп — острое респираторное вирусное заболевание, этиологически связанное с представителями трех родов из семейства Orthomyxoviridae (Каверин et al.,2008). Наиболее распространенные серотипы вируса гриппа: А,В и С, из них IAV вызывает наиболее тяжелые заболевания у всех видов животных (Taubenberger et al.,2010). Заболевания, вызываемые IAV, известны с конца XVI века, являясь причиной множеств эпидемий. Вирус быстро вырабатывает резистентность к лекарственным средствам. Для снижения вероятности вспышек новых эпидемий в НИОХ СО РАН был синтезирован новый противовирусный агент: 1,7,7-триметилбуцикло[2.2.1]гептан-2-илиден-аминоэтанол – соединение камфоры, которое показало большую эффективность ингибирования репродукции вируса гриппа A H1N1, H3N2, H5N2 и вируса гриппа B, ингибируя ранние стадии репродукции вируса. При этом камфецин обладает низкой токсичностью (Zarubaev et al., 2015, Yarovaya et al., 2013). Действия агента на внутренние органы млекопитающих изучены недостаточно. Римантадин был выбран препаратом сравнения, т.к. он, как и камфецин, ингибирует функции М2-канала в белковой оболочке вируса гриппа (Luo et al., 2007). Основной проблемой, связанной с производными адамантана является резистентность, выработанная у большого числа вирусов гриппа. Важным является и то, что препараты группы производных адамантана не проявляют ингибирующей активности против М2-протонного канала вируса гриппа В (Fiore et al, 2011)

Исходя из вышесказанного, целью данной работы является изучение функциональных и структурных особенностей реакции печени крыс в условиях введения нового противовирусного агента камфецина и препарата сравнения римантадина.

Для достижения поставленной цели сформулированы задачи:

• Определить функциональные характеристики печени крыс: активность аланинаминотрансферазы (АЛТ), активность аспартатаминотрансферазы (АСТ), активность гаммаглутамилтрансферазы (ГГТ), концентрацию глюкозы в плазме крови, концентрацию конъюгированного и общего билирубина в условиях введения камфецина в дозировке 100 мг/кг массы тела и римантадина в дозировке 100 мг/кг массы тела в течение 7 и 14 суток;
• Выявить особенности структурной реакции паренхимы печени: архитектоника печеночных долек, количество многоядерных гепатоцитов, наличие атипичных клеток, состояние стенок сосудов, наличие их отеков, отложений амилоида, интенсивность накопления билирубина и гликогена в клетках печени в условиях введения камфецина (100 мг/кг массы тела) и римантадина (100 мг/кг массы тела) в течение 7 и 14 суток;
• Установить корреляции морфологических и функциональных параметров при введении камфецина в дозировках 25 мг/кг массы тела и 50 мг/кг массы тела в течение 5 суток и римантадина в дозировке 100 мг/кг массы тела.

Выводы

• Камфецин, вводимый в дозировке 100 мг/кг массы тела в течение 7 суток в отличие от 14 суток, приводит к выраженной функциональной реакции со стороны печени, что выражается в появлении гипергликемии, уменьшении ферментативной активности (АЛТ, АСТ, ГГТ), уменьшении уровня общего билирубина и увеличении концентрации конъюгированного билирубина.
• Структурные перестройки печени в условиях действия камфецина и римантадина при введении в течение 7 и 14 суток заключаются в незначительном изменении строения паренхимы печени, проявившим себя снижением дифференцировки печёночных балок, при сохранном строении печёночных долек. Выявлено увеличение числа телец апоптоза и лимфоцитарной инфильтрации. При этом состояние сосудистой стенки, локализация отложений билирубина и гликогена не изменяются, что, по-видимому, связано с влиянием вводимых лекарственных агентов на гепатоциты, но не на процессы, протекающие внутри гепатоцитов.[О2] [WU3]

1. Введение камфецина вне зависимости от дозировки (25 и 50 мг/кг массы тела) и римантадина в течение 5 суток вызывает сходные структурные (умеренная лимфоцитарная инвазия, увеличение количества телец апоптоза, снижение уровня дифференцировки печеночных балок) и функциональные (повышение уровня активности АЛТ) эффекты, однако камфецин оказывает более выраженное влияние на гомеостатические параметры, что проявляется в возникновении гипергликемической реакции.

[WU1]Оля, зачем вы выводы переписали??? Верните те, что я писала (версия 21)! Если есть предложения по их корректировке, давайте обсудим отдельно слово за словом. У вас опять стиль уехал от научного к художественному, что для выводов противопоказано.

[О2]Не могу подобрать нужное слово. Типа агенты отравляют гепатоциты в целом, но в тонкие процессы обмена билирубина и запасов гликогена влияния особо не оказывают. Что-то типа того.

[WU3]Пока так оставим. Надо результаты по морфологии посмотреть